Diferencijalno dijagnostički (obojeni) hranljivi mediji. Vrste medija za kulturu Za većinu bakterija, diferencijalna dijagnostika

Vitamini u tačno propisanim dozama. Oni koriste aminokiseline kao izvore dušika. Prednost ovih podloga je da imaju konstantan sastav, mogu se koristiti za određivanje potreba mikroba za određenim nutrijentima.

Čvrsti hranljivi mediji se pripremaju iz tečnih medija uz dodatak zaptivača. Agar-agar se obično koristi kao zaptivač. Agar-agar je proizvod dobijen od morskih algi, žućkast je prah ili pločice, sadrži visokomolekularne polisaharide, ne razgrađuje ga većina mikroorganizama, ne uništava se autoklaviranjem, ne mijenja nutritivnu vrijednost podloge i ne razgrađuje ga većina mikroorganizama. ne inhibiraju rast mikroba. Za imunološka i bakteriološka polja koristi se smrznuti, pročišćeni agar, koji se kuhanjem ili autoklaviranjem mješavine praha i vode topi na temperaturi od 85-100°C, a kada se ohladi na 45-48°C formira gel.

Za pripremu gustih hranjivih podloga dodaje se agar-agar u koncentraciji od 1,5 do 3%.

Jednostavna okruženja.

Mesno-peptonski bujon (MPB) je proteinska osnova svih medija.

Postoji nekoliko načina za pripremu MPB-a:

a) u mesnoj vodi sa dodatkom gotovog peptona - to je takozvana mesno-peptonska juha;

b) na varenje produkata hidrolize sirovina uz pomoć enzima (tripsin - Hottinger bujon, pepsin - Martin bujon).

Pogodni su za transport, mogu se dugo skladištiti, oslobađaju laboratorije od ogromnog procesa pripreme medija i približavaju ih rješavanju pitanja standardizacije medija. Medicinska industrija proizvodi suhe podloge Endo, Levin, Ploskirev, bizmut sulfitni agar, hranjivi agar, ugljikohidrate sa BP indikatorom i druge.

Termostati

Termostati se koriste za uzgoj mikroorganizama.

Termostat je uređaj koji održava konstantnu temperaturu. Uređaj se sastoji od grijača, komore, dvostrukih zidova, između kojih cirkuliše zrak ili voda. Temperatura se reguliše termostatom. Optimalna temperatura za razmnožavanje većine mikroorganizama je 37°C.

Metoda za pripremu pločastog agara

MPA se otopi u vodenom kupatilu, a zatim ohladi na 50-55°C. Vrat boce se spali u plamenu alkoholne lampe, petrijeve posude se otvore tako da vrat boce stane bez dodirivanja ivica posude, ulije se 10-15 ml MPA, poklopac se zatvori zatvoren, posuda se protrese da se medij ravnomjerno rasporedi i ostavi na vodoravnoj površini dok se ne stvrdne. Nakon sušenja ploče sa agarom se čuvaju na hladnom.

Sjetva u petlju

Koristeći sterilno ohlađenu omču, uzmite kap materijala, lijevom rukom otvorite jedan rub čašice, unesite omču unutra i napravite nekoliko poteza na jednom mjestu sa petljom na suprotnoj ivici, zatim otkinite omču i inokulirajte materijal u paralelnim potezima od jedne do druge ivice čaše u razmaku od 5-6 mm. Na početku sjetve, kada ima puno mikroba na petlji, dat će konfluentan rast, ali svakim potezom ima sve manje mikroba u petlji, te će ostati usamljeni i stvarati izolirane kolonije.

Sjetva prema metodi Drigalsky

Ova metoda se koristi kada se inokulira materijal koji je jako kontaminiran mikroflorom (gnoj, izmet, sputum). Za sjetvu Drigalsky metodom uzmite lopaticu i nekoliko čaša (3-4). Spatula- ovo je instrument napravljen od metalne žice ili staklene strelice, savijen u obliku trokuta ili L-oblika. Materijal se petljom ili pipetom unosi u prvu čašu i istom lopaticom se ravnomerno raspoređuje po površini medijuma, bez sagorevanja, materijal se utrlja u hranljivi medij u drugoj čaši; u trećem. Sa takvom sjetvom, prva čaša će imati konfluentan rast, a izolirane kolonije će rasti u sljedećim čašama.

Izolacija čiste kulture prema Šukeviču

Za sjetvu uzmite svježe pripremljenu hranjivu podlogu sa kondenzatom. Ispitni materijal se uzima omčom i pažljivo, poštujući pravila asepse, bez dodirivanja medijuma i zidova, uvodi u kondenzacionu vodu. Bakterije velike pokretljivosti „puze“ na mokru površinu kosog agara.

Kao rezultat samostalnog rada student treba da zna:

1. Klasifikacija, morfologija gljiva, metode njihovog proučavanja.

2. Klasifikacija i morfologija aktinomiceta.

3. Pravila protivepidemijskih režima i sigurnosne mjere.

biti u mogućnosti da:

1. Razlikujte mikroorganizme pomoću mikroskopije.

2. Mikroskopirajte obojene preparate.

3. Dezinfikujte materijal, tretirajte ruke dezinfekcionim sredstvima.

4. Pripremiti preparate od čistih kultura.

Hranljive podloge se klasifikuju prema svom sastavu i namjeni.

1.Po sastavu hranljive podloge se dele na jednostavno i složeno

Postoji grupa okruženja opšte namene - jednostavna. U ovu grupu spadaju mesno-peptonski bujon (jednostavna hranljiva juha), mesno-peptonski agar (jednostavan hranljivi agar), hranljivi želatin. Ovi mediji se koriste za uzgoj mnogih patogenih mikroba. Podloge opšte namene, ili jednostavne hranljive podloge, obično se pripremaju od hidrolizata uz dodatak peptona i natrijum hlorida. Koriste se i kao osnova za pripremu složenih medija.

Također, prema svom sastavu razlikuju se proteinski, bez proteinski i mineralni mediji. 2. Po poreklu okruženja se dijele na umjetno i prirodno (prirodno).

Prirodni hranljivi mediji mogu sadržavati komponente životinjskog (na primjer, krv, serum, žuč) ili biljnog (na primjer, komadići povrća i voća) porijekla.

3.Prema namjeni dodijeliti sredstva za konzerviranje(za primarnu sjetvu i transport), okruženje za obogaćivanje(za nakupljanje određene grupe bakterija), mediji kulture(univerzalni jednostavni, složeni specijalni i za stvaranje toksina), mediji za izolaciju i akumulaciju (konzervans, obogaćivanje i selektivni) i okruženje za identifikaciju(diferencijalno i elektivno-diferencijalno).

Mediji za kulturu konzervansa sprječavaju smrt patogena i potiskuju rast saprofita. Najviše se koriste mješavina glicerina, hipertonični rastvor, glicerinski konzervans sa LiCl 2, rastvor natrijum citrata i natrijum deoksiholat.

Medij za obogaćivanje bakterija

Mediji za obogaćivanje(npr. Kitta-Tarozzi medij, selenit bujon, tioglikolatni medij) se koriste za akumulaciju određene grupe bakterija stvaranjem uslova koji su optimalni za neke vrste, a nepovoljni za druge. Najčešće se kao takvi agensi koriste razne boje i hemikalije - žučne soli, Na+ tetrationat, K telurit, antibiotici, fuksin, gentian violet, briljantno zeleno itd.

Mediji se također razlikuju prema namjeni. elektivna, specijalna i diferencijalna dijagnostika.

Elektivna okruženja (selektivna, selektivna, akumulacija, obogaćivanje). Princip stvaranja selektivnih hranljivih podloga zasniva se na zadovoljavanju osnovnih biohemijskih i energetskih potreba vrste mikroba za koju su namenjene za uzgoj, odnosno na dodavanju inhibitora koji suzbijaju rast prateće mikroflore. Određeni sastav i koncentracija hranljivih materija, mikroelemenata, faktora rasta pri strogo definisanoj pH vrednosti ili dodatkom inhibitora obezbeđuju optimalne uslove za uzgoj jedne ili više vrsta mikroorganizama. Kada se na njih sije materijal koji sadrži mješavinu različitih mikroba, prvo će se pojaviti rast vrsta za koje će okruženje biti selektivno. Primjeri elektivnih medija su žučna juha, selenitna juha, Ploskirev medij - za uzgoj mikroba iz intestinalne porodice, alkalna peptonska voda - za Vibrio cholerae.

Žučni bujon. MPB se dodaje 10-20% volovske žuči. Žuč potiskuje rast koka i zračne flore, ali je povoljna za razmnožavanje salmonele.

Selenit bujon. Sastoji se od fosfatne juhe sa dodatkom natrijeve soli selenita, koja je inhibitor rasta kokalne flore i Escherichia coli, ali ne inhibira rast salmonele.

srijeda Ploskireva. Gusti medij koji sadrži inhibitore E. coli, coli, ali je povoljan za rast Shigella i Salmonella, čiju reprodukciju ne inhibiraju briljantna zelena i žučne soli.

Peptonska voda. Sadrži 1% peptona i 0,5% natrijum hlorida. Okolina je selektivna za Vibrio cholerae, jer umnožavaju se bolje od drugih bakterija u “izgladnjelim sredinama”, posebno u alkalnim reakcijama, jer same luče kisele otpadne proizvode.

Posebna okruženja. Neophodan za uzgoj bakterija koje ne rastu na jednostavnim hranjivim podlogama. Za neke organizme potrebno je dodati ugljikohidrate, krv i druge dodatne hranjive tvari u jednostavne hranljive podloge. Primjeri jednostavnih hranljivih podloga su šećerna juha i šećerni agar za streptokoke (pripremljeni od MPB i MPA, u koje se dodaje 0,5-2% glukoze).

Za pneumokoke i meningokoke poseban medij je juha od surutke i whey agar (za pripremu whey bujona pomešati 1 deo MPB sa 2 dela svežeg seruma; za dobijanje whey agara dodaje se 10-25% sterilnog konjskog ili goveđeg seruma rastopljeni MPA).

Diferencijalna dijagnostička okruženja koristi se za određivanje vrste mikroba koji se proučava, na osnovu karakteristika njegovog metabolizma. Prema svojoj namjeni, diferencijalno dijagnostička okruženja se dijele na sljedeći način:

1. Mediji za detekciju proteolitička sposobnost mikrobi koji sadrže mlijeko, želatin, krv itd.

2. Mediji sa ugljikohidratima i polihidričnim alkoholima za

otkrivanje raznih saharolitički enzimi.

Sljedeći indikatori se dodaju u sastav diferencijalnih dijagnostičkih medija dizajniranih za identifikaciju saharolitičkih svojstava i redoks enzima: neutralna crvena, kiseli fuksin, bromotimol plava, vodena plava sa rozolnom kiselinom (BP). Promjenom svoje boje pri različitim pH vrijednostima, indikator ukazuje na prisustvo enzima i razgradnju sastojka unesenog u podlogu.

Primjeri diferencijalno dijagnostičkih okruženja:

Endo medium. Sastoji se od MPA sa dodatkom 1% laktoze i bazičnog fuksina (indikatora) obezbojenog natrijum sulfitom. Endo medij ima blago ružičastu boju. Koristi se u dijagnozi crijevnih infekcija za razlikovanje bakterija koje razgrađuju laktozu i formiraju kisele produkte od bakterija koje nemaju tu sposobnost. Kolonije mikroba pozitivnih na laktozu (Escherichia coli) su crvene zbog smanjenja fuksina. Kolonije laktoza-negativnih mikroorganizama - salmonele, šigele, itd. - su bezbojne.

Diferencijalna dijagnostička okruženja uključuju kratka i proširena šareni red. Sastoji se od medijuma sa ugljenim hidratima (Hiss media), MPB, mleka i mesno-peptonskog želatina.

Hiss media pripremaju se na bazi peptonske vode u koju se dodaju hemijski čisti mono-, di- ili polisaharidi (glukoza, laktoza, skrob itd.).

Za detekciju pH pomaka kao rezultat stvaranja kiselina i razgradnje ugljikohidrata, u mediju se dodaje indikator. Dubljom razgradnjom ugljikohidrata nastaju plinoviti produkti (CO 2, CH 4 itd.) koji se hvataju plovcima - malim epruvetama spuštenim naopako u medij. Podloge sa ugljikohidratima mogu se pripremiti i kao guste podloge uz dodatak 0,5-1% agar-agara. Tada se detektuje formiranje gasa formiranjem mjehurića (pukotina) u stupcu medija.

Na MPB, koji je dio šarolike serije, pronađeni su proizvodi koji nastaju razgradnjom aminokiselina i peptona (indol, sumporovodik). Vodonik sulfid detektuje se stavljanjem trake filter papira namočenog u rastvor olovnog acetata u MPB nakon sjetve kulture. Kada se aminokiseline koje sadrže sumpor razgrađuju, oslobađa se sumporovodik, a papir postaje crn zbog stvaranja olovnog sulfida. Odrediti indol možete koristiti složeni indikator. Indol nastaje razgradnjom triptofana i može se otkriti kada se ovaj indikator doda kulturi uzgojenoj na MPB. U prisustvu indola, MPB postaje zelen ili plav.

U praktičnim bakteriološkim laboratorijama imaju široku primjenu mikro i ekspres metode za indikativno proučavanje biohemijskih svojstava mikroorganizama. Postoji mnogo sistema za testiranje za ovu svrhu. Najčešći sistem indikatorskih papira (NIB). SIB su diskovi od filter papira impregnirani rastvorima šećera ili drugih supstrata u kombinaciji sa indikatorima. Takvi diskovi se spuštaju u epruvetu s kulturom uzgojenom u tekućem hranjivom mediju. O radu enzima sudi se po promjeni boje diska sa supstratom. Mikrotest sistemi za proučavanje identifikacije enterobakterija predstavljeni su plastičnim posudama za jednokratnu upotrebu sa medijima koji sadrže različite supstrate uz dodatak indikatora. Posijavanje čiste kulture mikroorganizama u takve test sisteme omogućava vam da brzo identifikujete sposobnost bakterija da iskoriste citrate, glukozu, saharozu, oslobađaju amonijak, indol, razlažu ureu, lizin, fenilalanin itd.

Hranljivi agar, kao i glavni diferencijalno dijagnostički mediji, trenutno se proizvode u obliku suhih preparata koji sadrže sve potrebne komponente. Takvim prašcima samo treba dodati vodu i prokuhati, a zatim ih, nakon sipanja, sterilizirati.

Diferencijalni dijagnostički mediji su posebne mješavine hranjivih tvari koje se koriste za određivanje vrste mikroba i proučavanje njihovih svojstava. Kada bakterije rastu na diferencijalnoj dijagnostičkoj podlozi, dolazi do kemijskih procesa zbog prisustva različitih bakterija u mikrobnoj stanici. Neki od njih su sposobni da se razgrađuju, drugi -, treći - izazivaju oksidacione i redukcijske reakcije itd. Zahvaljujući djelovanju enzima dolazi do odgovarajućih promjena u diferencijalno dijagnostičkom okruženju.

Diferencijalna dijagnostička okruženja mogu se podijeliti u četiri glavne grupe.

Rice. 1-6. Razni oblici razgradnje želatine. Rice. 7 - 9. Tečni medij sa ugljikohidratima i Andrade indikatorom: sl. 7 - nema fermentacije; pirinač. 8 - fermentacija sa stvaranjem kiseline; pirinač. 9 - fermentacija sa stvaranjem kiseline i gasa. Rice. 10 - 12. Polutečna podloga sa indikatorom ugljenih hidrata i krvnog pritiska (iz suve hranljive podloge): sl. 10 - nema fermentacije; pirinač. 11 - fermentacija sa stvaranjem kiseline; pirinač. 12 - fermentacija sa stvaranjem kiseline i gasa. Rice. 13-15. Seitz umjetni lakmus serum: Sl. 13 - nema fermentacije; pirinač. 14 - fermentacija sa stvaranjem kiseline; pirinač. 15 - fermentacija sa formiranjem. Rice. 16 i 17. Mlijeko sa metilenskim plavim: sl. 16 - nedostatak redukcije; pirinač. 17 - smanjenje. Rice. 18 i 19. Simonsov medij: sl. 18 - nedostatak asimilacije citrata; pirinač. 19 - asimilacija citrata. Rice. 20 - 24. Lakmus mlijeko: pirinač. 20 - nema fermentacije; pirinač. 21 - fermentacija sa stvaranjem kiseline; pirinač. 22 - fermentacija sa stvaranjem lužine; pirinač. 23 - peptonizacija; pirinač. 24 - smanjenje. Rice. 25. Ukapljivanje umotanog proizvoda (u propuštenom svjetlu). Rice. 26. Hemoliza na krvnom agaru (u propuštenom svjetlu). Rice. 27. Krvni medijum sa kalijum teluritom.

1. Podloge koje sadrže proteine ​​i otkrivaju sposobnost mikroba da razgrađuju proteine ​​(proteolitička svojstva): mesno-peptonska “kolona”, koagulirani konjski ili goveđi serum, mlijeko, krvni agar. Prilikom inokulacije bakterija punkcijom u mesno-peptonski želatin, u “koloni”, u slučaju razgradnje proteina, uočava se ukapljivanje podloge. Kada se inokulira na podlogu sa koaguliranom sirutom, razgradnja proteina je određena ukapljivanjem podloge i stvaranjem udubljenja na njegovoj površini. Razgradnja mlijeka od strane mikroba otkriva se čišćenjem ili otapanjem prvobitno zgrušanog mlijeka. Prisustvo hemolitičke aktivnosti test kulture provjerava se inokulacijom na poseban krvni agar. Kao rezultat razaranja oko kolonija (na primjer, hemolitičke ili) formiraju se zone čišćenja.

2. Mediji za identifikaciju sposobnosti mikroba da razgrađuju ugljikohidrate i visokoatomske (medij Endo, medij Levin, medij Russell, medij Drigalsky - Conradi, medij Rapoport - Weintraub, medij Shustov). Za identifikaciju ovih svojstava mikroorganizama koristi se i "raznobojna" serija, odnosno serija epruveta koje sadrže različite ugljikohidrate, polihidrične alkohole i indikator. Kao indikatori koriste se tinktura lakmusa ili bromotimol plavo. Razgradnja bilo kojeg od ugljikohidrata sa stvaranjem kiseline otkriva se promjenom boje indikatora, stvaranje plina se otkriva punjenjem plina i plutanjem posebnog staklenog plovka u tekućem mediju. Ili koristite polutekuću Hiss podlogu (vidi) sa 0,5% agara sa odgovarajućim šećerima i Andrade indikatorom. Nakon inokulacije mikroba na ove podloge, formiranje kiseline detektuje se crvenilom podloge, a stvaranje gasa pojavom njegovih mehurića u agaru ili pucanjem i pomeranjem kolone agara naviše. Diferencijalno dijagnostička podloga druge grupe uključuje i škrobni agar koji se koristi za određivanje sposobnosti mikroba da razgrađuju škrob, Clarkovu podlogu itd.

3. Podloge na kojima se otkriva sposobnost mikroba da obezboje boje dodane u juhu: metilensko plavo, tionin, lakmus, neutralno crveno ili druge (Rothbergerov medij, Omeljanskijev medij). U treću grupu spadaju i podloge sa nitratima, koje se koriste za određivanje sposobnosti mikroba da redukuju soli azotne kiseline (nitrate) u soli azotne kiseline (nitrite), a zatim u amonijak ili slobodni azot.

4. Podloge koje otkrivaju sposobnost mikroba da asimiliraju supstance koje nisu probavljive od drugih mikroba, na primjer, podloga s natrijum citratom (Simons citrat agar) za razlikovanje Escherichia coli, koja nema sposobnost da asimiluje ovaj medij, od drugih bakterija crijevne grupe, ili podloga sa natrijum oleinskom kiselinom za diferencijaciju bacila difterije od lažne difterije i difteroida (Engeringov agar).

Diferencijalne dijagnostičke podloge također uključuju podloge za diferenciranje anaeroba, teluritne medije za diferenciranje bakterija difterije, podloge sa ureom, alkalne podloge (Dieudonne agar) za kultivaciju Vibrio cholerae, itd. Vidi također Identifikacija mikroba.

CPM funkcije.

1. zaštitni.

2. lokalizacija CPE enzima.

12. Bakterijski nukleoid sadrži:

2. poliamini.

13. Bakterije imaju:

1. jedan hromozom.

2. dva hromozoma.

14. Bakterijski hromozom:

1. prsten.

2. fiksiran na centralnu procesorsku jedinicu.

15. Sporulacija u bakterijama:

1. javlja se u vanjskom okruženju.

2. služi za reprodukciju.

16. Sporovi:

1. Bojana po gramu.

17. Vrijednost kapsule:

1. zaštitni.

2. formativni.

18. Kapsule:

1. Bojana po gramu.

2. vidljivo na boji po Gramu.

19. Kapsule štite bakterije od:

1. antitela

2. fagocitoza.

20. Flagella:

1. Svako ima bakterije.

2. uvijek nalazi na svim površinama.

21. Flagele se sastoje od:

1. proteini.

2. ugljeni hidrati.

22. Flagella:

1. Bojana po gramu.

2. obojeno prema Buri Ginsu.

23. Proučava se mobilnost bakterija:

1. setvu u polutečni agar.

2. setva na MPA.

24. Trepavice (pio):

1. imaju ga sve bakterije.

2. funkcionalno različita

25. Proučavanje ukupnosti velikog broja znakova bakterija neophodno je za:

1. sistematika gena.

2. numerička taksonomija.

26. Završna taksonomska jedinica u bakteriologiji:

27. Glavni morfološki oblici bakterija:

2. presvučena.

28. Komponente LPS bakterija:

1. lipid A.

2. polisaharid.

29. Sastav peptidoglikana uključuje:

1. teihoične kiseline.

2. N-acetilglukozamin i M-acetilmuranska kiselina.

30. Tinktorijalna svojstva bakterija karakteriziraju:

1. stabilnost u vanjskom okruženju.

2. osjetljivost na fage.

Kompleksne metode farbanja...

1. Will-Neelsen bojenje.

2. Neisser bojenje.

Mikroskopske metode za proučavanje strukture unutrašnjih struktura bakterijskih ćelija.

1. fazni kontrast.

2. elektronski

33. Nukleoid bakterija:

1. povezan sa LPS-om.

2. nema nuklearnu membranu.

34. Za bojenje bakterijskih spora koristite:

1. bojenje prema Buri-Gins.

2. Klein bojenje.

35. Nekulturni oblici bakterija se otkrivaju pomoću hranljivog medijuma:

36. Metabolizam bakterija:

1. ne razlikuje se od metabolizma živih bića. ćelije.

2. intenzivniji nego što je metabolizam živ. ćelije.

37. Aerobna razgradnja proteina označava se terminom:

1. fermentacija.

2. tinjajući.

38. Anaerobna razgradnja proteina označava se terminom:

1. oksidacija.

2. truljenje.

39. CO 2 se koristi kao jedini izvor ugljikohidrata:

1. autotrofi.

2. paratrofi.

40. Organski izvori ugljenih hidrata koriste se:

1. heterotrofi

2. autotrofi

41. Koriste se anorganski izvori ugljenih hidrata:

1. metatrofi.

2. auksotrofi.

42. Ovisnost bakterije o određenom supstratu označava se izrazom:

1. prototrofija.

2. heterotrofija

43. Razmnožavanje bakterija se dešava:

1. pupanje.

2. osmozom.

44. Aktivni transport ide:

1. duž gradijenta koncentracije.

45. Pasivni transport ide:

1. duž gradijenta koncentracije.

2. protiv gradijenta koncentracije.

46. ​​CPE u bakterijama je lokaliziran u:

1. ćelijski zid.

47. Jednostavan hranljivi medij:

1. šećerna čorba.

48. Kompleksna hranljiva podloga:

1. šećerna čorba.

49. Izborni hranljivi mediji vam omogućavaju da:

1. razlikovati jednu vrstu bakterija od druge.

2. uzgajati bakterije jedne vrste.

50. Diferencijalna dijagnostička okruženja omogućavaju:

1. Uzgajati bakterije sa složenim nutritivnim potrebama.

2. razlikovati jednu vrstu bakterija od drugih.

51. Zahtjevi za hranljive podloge:

1. sterilitet.

2. nutritivna vrijednost.

52. Određivanje saharolitičke aktivnosti vrši se setvom na:

2. Peškov srijeda.

53. Jednostavni hranljivi mediji se sterilišu u:

1. termostat.

2. Pasterove peći.

54. Mediji sa ugljenim hidratima se sterilišu:

1. u Pasteur rerni.

2. u autoklavu na 0,5 atm.

55. Laboratorijsko stakleno posuđe se steriliše u:

1. termostat.

2. Pasterove peći.

56. Optimalni pH hranljivih podloga za većinu patogenih bakterija:

Mehanizmi transporta supstanci u bakterijsku ćeliju, koji zahtevaju potrošnju energije.

1. pasivna difuzija.

2. aktivni transport.

Podloga koja se koristi za selektivnu izolaciju čiste bakterijske kulture

određena vrsta materijala koji sadrži raznovrsnu mikrofloru:

1. osnovni

2. diferencijalno - dijagnostički.

Diferencijalna dijagnostička okruženja.

1. Šištanje okruženje

60. Metode za izolaciju čistih kultura bakterija:

1. setva u nizu.

2. zasijavanje u nizu sa paljenjem u petlji.

61. Kulturna svojstva bakterija:

1. pojava bakterija.

2. odnos prema uslovima uzgoja.

62. Za utvrđivanje proteolitičke aktivnosti bakterija rade se sljedeća ispitivanja:

1. za ukapljivanje želatine.

2. za fermentaciju glukoze.

63. Faze bakteriološkog istraživanja:

1. sjetva za izolaciju čiste kulture bakterija.

2. nakupljanje čiste kulture bakterija.

64. Za određivanje vrste bakterije potrebno je proučiti:

1. morfološka svojstva

2. kulturna dobra.

65. Biohemijska svojstva bakterija su:

1. sposobnost bakterija da razgrađuju složene nutrijente.

2. sposobnost razgradnje na sintetičkim hranljivim podlogama.

66. Sastav nukleoida uključuje:

2. poliamini.

67. Funkciju regulatornih proteina u bakterijama obavljaju:

1. histoni.

2. poliamini.

68. Bakterije sadrže:

1. haploidni skup hromozoma.

2. diploidni skup hromozoma.

69. Bakterijski hromozom:

1. prsten.

2. slobodno lažu.

70. IS sekvence:

1. imaju autonomnu replikaciju.

2. nose strukturne gene.

71. Mobilni genetski elementi:

1. IS sekvence.

2. transpozoni.

72. Transposoni:

73. Genetski materijal bakterija se nalazi u:

1. hromozom.

2. plazmidi.

74. Plazmidi sadrže:

1. strukturni gen

2. replikacija gena

75. U bakterijskoj ćeliji:

2. nekoliko kopija jednog plazmida.

76. Ćelije zadržavaju vitalnost kada izgube:

1. plazmidi

2. hromozomi.

77. Ćelije umiru kada izgube:

1. plazmidi.

2. hromozomi.

78. Genotipska ekspresija spola kod bakterija povezana je sa prisustvom:

1. Kol-plazmidi.

2. Hej-plazmidi.

79. Sojevi sa visokom donorskom aktivnošću nazivaju se:

1. Hfr sojevi.

2. R-sojovi.

80. Izmjene:

1. utiču na genotip.

2. utiču na fenotip.

81. Modifikacija je manifestacija:

1. genotipska varijabilnost.

2. fenotipska varijabilnost.

82. Mutacije:

1. utiču na genotip.

2. utiču na fenotip.

83. Genotipska varijabilnost:

1. mutacije

2. modifikacije.

84. Mehanizam rekombinacije kod bakterija:

1. transkripcija.

2. transformacija.

85. Tokom rekombinacije u bakterijama:

1. formira se merozigot.

2. Količina genetskog materijala se mijenja.

86. Prijenos genetske informacije od strane umjerenog faga je:

1. transdukcija.

2. transformacija

87. Bakterijska populacija prema jednoj ili drugoj osobini:

1. homogena.

2. heterogena.

88. Promjene u genotipu bakterije mogu nastati:

1. vertikalno.

2. horizontalno.

89. Genetske metode koje se koriste u dijagnostici:

1. DNK sondiranje.

90. Svrha PUR dijagnostike:

1. identifikacija nukleotidnih sekvenci koje kodiraju vrste bakterija.

2. identifikacija nukleotidnih sekvenci koje kodiraju glavni faktor virulencije date vrste mikroorganizama.

91. Fagi su:

1. bakterije virusi.

2. bakterijski toksini.

92. Svojstva faga:

1. zaraznost.

2. filtrabilnost.

93. Fage sadrže:

1. DNK i RNK.

2. DNK ili RNK.

94. Fage karakteriše:

1. disjunktivni način reprodukcije.

2. razmnožavaju se jednostavnom poprečnom podjelom.

95. Fagi su:

1. umjeren.

2. virtuelni.

96. Interakcija faga sa bakterijskom ćelijom može se dogoditi na sljedeći način:

1. produktivna infekcija.

2. abortivna infekcija.

97. Lizogene ćelije se razlikuju od nelizogenih ćelija po:

1. UV otpornost.

2. osjetljivost na homologni fag.

98. Metode za izolaciju faga:

1. filtracija kroz bakterijske filtere.

2. setva na hranljive podloge.

99. Fage se mogu otkriti:

1. usporavanje rasta indikatorske kulture.

2. formiranje negativnih kolonija.

100. Fani se koristi za:

1. tretman.

2. prevencija.

101. Za produktivne infekcije fagom:

1. bakterijska ćelija umire.

2. fag se umnožava.

102. Virulentni fagi uzrokuju:

1. liza ćelija.

2. lizogena konverzija.

103. Umjereni fagi uzrok:

1. liza ćelija.

2. lizogenizacija bakterija.

104. Lizogene bakterije sadrže:

1. profage.

2. S – elementi.

105. Profag je:

1. integrisano stanje faga.

2. slobodno stanje faga.

106. Fage se po specifičnosti dijele na:

1. vrste.

2. virulentna.

107. Fagi se koriste za fagotipizaciju bakterija:

1. polivalentan.

2. vrste.

108. Tipizacija faga se vrši u svrhu:

1. epidemiološka analiza.

2. odabir faga za tretman.

109. Fage vrste se koriste:

1. tokom bakteriološke studije.

2. prilikom izvođenja PCR-a.

110. Praktična upotreba faga se zasniva na:

1. njihova specifičnost.

2. sposobnost izazivanja lize bakterija.

111. Prisustvo faga u filtratu određuje se:

1. primjena indikatorske kulture na travnjaku.

2. setva na hranljivu podlogu.

112. Visoku bakterijsku kontaminaciju karakteriše:

1. debelo crijevo

2. tanka crijeva.

113 Na sastav vrsta mikroflore pojedinca utiču:

1. godine.

2. ekološka niša.

114. Funkcije normalne mikroflore:

1. formiranje vitamina.

2. formiranje hormona.

115. Disbakterioza je:

1. kvalitativna promjena normalne mikroflore.

2. kvantitativna promjena normalne mikroflore.

116. Uzroci disbioze:

1. radijaciona bolest.

2. teške infekcije.

117. Indikatori disbakterioze:

1. pojava patogenih bakterija.

2. pojava ili povećanje broja normalno rijetkih mikroorganizama.

118.Metode laboratorijske dijagnostike disbakterioze:

1. kvantitativni bakteriološki

2. serološki.

119.Principi korekcije disbioze:

1. simptomatska terapija.

2. antibiotici.

120. Lijekovi za ispravljanje crijevne disbioze:

1. bificol.

2. bifidumbakterije.

Koriste se za razlikovanje pojedinih vrsta ili grupa mikroorganizama. Princip konstruisanja ovih podloga zasniva se na činjenici da se različite vrste mikroorganizama međusobno razlikuju po biohemijskoj aktivnosti zbog različitog skupa enzima.

DDS uključuje:

1. Hranljiva osnova koja osigurava proliferaciju mikroorganizama

2. Određeni ugljeni hidrati - laktoza

3. Indikator čija promjena boje ukazuje na pomak pH medija prema kiseloj strani zbog fermentacije odgovarajućeg ugljikohidrata.

DDS se aktivno koristi za razlikovanje tipova mikroorganizama iz intestinalne porodice.

Izborni mediji kulture

Dizajniran za selektivnu izolaciju i akumulaciju mikroorganizama određene vrste (ili grupe) iz materijala koji sadrže različitu stranu mikrofloru. Prilikom stvaranja ovih okruženja, oni se temelje na biološkim karakteristikama koje razlikuju mikroorganizme od većine drugih. Na primjer, selektivni rast stafilokoka se opaža pri povećanim koncentracijama soli, a Vibrio cholerae - u alkalnoj sredini.

Prolijte medije

1. Agar podloga u Petrijevim posudama:

a) rastopiti u vodenom kupatilu, ohladiti na 45-50ºS sa MPA

b) stavite šolju sa poklopcem prema gore

c) uzmite posudu u desnu ruku, držeći je blizu vatre

d) lijevom rukom izvadite utikač, držeći ga malim prstom i dlanom

e) medijumom zapalite vrat boce i lagano otvorite poklopac sa dva prsta lijeve ruke

f) ispod njega ubaciti grlić boce, ne dodirujući ivicu šolje, i sipati 15-20 ml. okruženje.

Ako se sjetva vrši na dan prosipanja medija, onda se mora sušiti u termostatu 20-30 minuta u rastavljenom obliku, otvorenom stranom prema dolje. Ako se sjetva vrši sljedećeg dana, tada se čaše, bez sušenja, umotaju u isti papir u kojem su sterilizirane i stave u hladnjak.

2. Agar podloga u epruvetama:

a) uzeti posudu sa rastopljenim i ohlađenim na 45ºS medijumom

b) uzmite epruvetu lijevom rukom

c) desnom rukom izvadite čep iz epruvete, a lijevom rukom iz posude sa medijumom, držeći ga malim prstom i dlanom

d) spaliti ivice epruvete i posude sa medijumom, dodati 3-5 ml medijuma u epruvetu

e) ponovo spaliti grlove kontejnera, zatvoriti ih čepovima

Agar podloga se može stvrdnuti u epruvetama u obliku:

1. Beveled stub

2. Kombinovana kolona

3. Kolona

Za dobijanje zakošene i kombinovane kolone, epruvete sa rastopljenom agar masom postavljaju se u nagnutom položaju na posebnom postolju tako da se medijum ne proteže do 2/3 epruvete i ne navlaži čep. Nakon što se medij očvrsne, epruvete se postavljaju okomito u rešetku i kondenzat se ostavlja da se ocijedi. Nemoguće je koristiti okoliš bez kondenzacije. Treba ga ponovo rastopiti u vodenom kupatilu i pokositi.

Mesni pepton agar