Die phagozytische Aktivität von Leukozyten ist unter dem Normalwert. Phagozytische Aktivität von Leukozyten

Untersuchung der phagozytischen Aktivität von Leukozyten- ein Bluttest, der darauf abzielt, die Reservekapazität von Neutrophilen und Monozyten zu bestimmen, um ihre Hauptfunktion zu erfüllen - die Absorption und Verarbeitung von Fremdstoffen. Der Test wird im Immunogramm-Komplex durchgeführt. Es ist indiziert für Patienten mit wiederkehrenden und chronischen Infektionen, erworbenen und genetisch bedingten Immunschwächezuständen, Autoimmunerkrankungen und onkologischen Erkrankungen, die sich komplexen Operationen, einschließlich Organtransplantationen, unterzogen haben. Vollblut wird analysiert. Die Studie basiert auf der Bewertung der Phagozytose von Bakterien mit fluoreszierenden Markierungen. Normalerweise machen phagozytische Granulozyten 82 bis 90% der Gesamtzahl aus, phagozytische Monozyten - 75 bis 85%. Ergebnisbereitschaft - bis zu 8 Tage.

Die phagozytische Aktivität von Leukozyten ist ein Laborindikator, der den Prozentsatz von Neutrophilen und Monozyten widerspiegelt, die in der Lage sind, an pathogene Mikroflora zu binden und diese zu verdauen. Fresszellen sind Zellen, die den Körper vor Infektionen schützen. Sie gelten als Bestandteil der angeborenen Immunität, im Blut werden sie durch zwei Arten von Leukozyten repräsentiert - Monozyten und Neutrophile. Monozyten sind große Zellen - Makrophagen. Sie haben eine ausgeprägte Fähigkeit, große Zellen und organische Verbindungen zu absorbieren, zu verarbeiten. Am Ort der Entzündung phagozytieren sie Bakterien, Leukozytenmasse und betroffene Zellen. Dadurch wird das Gewebe gereinigt und für die Regeneration vorbereitet. Neutrophile sind Mikrophagen, die im Gegensatz zu Monozyten nur kleine Zellen und organische Bestandteile aufnehmen. Nach der Verarbeitung von Wirkstoffen sterben Neutrophile ab, setzen Substanzen frei, die Bakterien und Pilze schädigen, und erhöhen den Fluss von Immunzellen zum Ort der Entzündung.

Ein Bluttest für die phagozytische Aktivität von Leukozyten ermöglicht es Ihnen, die Reserve von Monozyten und Neutrophilen für die Verdauung von Fremdstoffen zu beurteilen. Die Veränderung der Eigenschaften von Phagozyten spiegelt nicht nur die immunologische Reaktivität des Körpers wider, sondern auch die Eigenschaften einiger anderer Prozesse - Protein- und Kohlenhydratstoffwechsel, Vorhandensein von Vergiftung und Erschöpfung des Körpers, Erholungsaktivität nach Krankheiten usw. Daher wird die Analyse nicht nur in der Immunologie und Infektionskrankheiten, sondern auch in der Rheumatologie, Onkologie und Chirurgie eingesetzt. Die Ergebnisse der Studie werden als Prozentsatz aktiver Fresszellen zu ihrer Gesamtzahl angezeigt. Der Nachweis von aktiven Neutrophilen und Monozyten erfolgt unter Verwendung von Bakterien mit fluoreszierenden Markierungen. Das Biomaterial für die Studie ist Vollblut mit Heparin.

Hinweise

Bei Verdacht auf angeborene oder erworbene Immunschwäche ist eine Untersuchung der phagozytischen Aktivität von Leukozyten indiziert. Es wird bei langwierigen, chronischen und wiederkehrenden Infektionskrankheiten verschrieben - ein charakteristisches Zeichen für eine Abnahme der Immunität. Am häufigsten werden Patienten mit Lungenentzündung, Sinusitis, Mittelohrentzündung, Enterokolitis, Candidiasis und Zystitis zur Analyse geschickt. Auch längerfristig nicht heilende Wunden, Komplikationen nach Operationen können auf einen fehlenden Immunschutz hindeuten. Daher wird die Analyse in Vorbereitung auf die Operation und im komplizierten Verlauf der postoperativen Phase mit langfristiger Genesung von Verletzungen und Verbrennungen durchgeführt. Weitere Indikationen für diese Studie sind allergische, Autoimmun- und onkologische Erkrankungen. Die Ergebnisse ermöglichen es, die Aktivität der Immunabwehr (Phagozytose) und ihre Rolle bei der Entstehung der Krankheit zu beurteilen.

Ein Bluttest auf die phagozytische Aktivität von Leukozyten ermöglicht es, die tatsächliche Abwehrbereitschaft des Körpers gegen Infektionen zu bestimmen. Es sei jedoch daran erinnert, dass sich dieser Indikator unter dem Einfluss vieler Faktoren ändert. So nimmt die Aktivität von Monozyten und Neutrophilen nach körperlicher Anstrengung und geistiger Erschöpfung ab und steigt nach kalorienreicher Nahrungsaufnahme. Eine weitere Einschränkung der Analyse besteht darin, dass das Untersuchungsverfahren bis zu 8 Arbeitstage dauert, die erhaltenen Ergebnisse den Stand von vor einer Woche wiedergeben.

Vorbereitung zur Analyse und Sammlung von Material

Um die phagozytische Aktivität von Leukozyten zu untersuchen, wird Blut aus einer Vene entnommen. Am Tag vor der Analyse sollte Alkohol aus der Ernährung ausgeschlossen, sportliches Training und andere intensive körperliche Aktivitäten abgesagt und Stresssituationen vermieden werden. Es ist auch notwendig, einen Arzt über die Auswirkungen der eingenommenen Medikamente auf das Ergebnis der Studie zu konsultieren. Es ist möglich, dass einige Medikamente vorübergehend abgesetzt werden. Die Blutentnahme wird normalerweise morgens nach einer nächtlichen Fastenperiode oder 4 Stunden nach einer Mahlzeit durchgeführt.

Blut wird durch eine Punktion aus der Vena cubitalis entnommen, um die phagozytische Aktivität von Leukozyten zu untersuchen, wird am häufigsten die Methode zur Beurteilung der Phagozytose von Bakterien mit einem fluoreszierenden Marker verwendet. Aus dem Blut werden durch Zentrifugieren und Waschen Monozyten und Neutrophile isoliert - das Untersuchungsmaterial. Dann wird eine Kultur lumineszierender Bakterien in die Probe eingeführt, die Mischung wird resuspendiert und inkubiert, und die Anzahl der Leukozyten, die Bakterien phagozytieren, wird durch die Intensität der Lumineszenz bestimmt. Die Ergebnisse der Analyse werden innerhalb von 7-8 Werktagen erstellt. Die phagozytische Aktivität von Monozyten und Neutrophilen kann auch durch andere Verfahren bestimmt werden, beispielsweise durch Anfärben phagozytierter Zellen (Romanovsky-Giemsa-Verfahren), durch die Aktivität lysosomaler Enzyme, durch die Produktion von Zytokinen, durch das Vorhandensein von kationischen Proteinen.

Normale Werte

Das Ergebnis eines Bluttests für die phagozytische Aktivität von Leukozyten wird als Prozentsatz der phagozytischen Zellen ihrer Gesamtzahl ausgedrückt. Die normalen Werte für Granulozyten liegen zwischen 82 und 90%, für Monozyten zwischen 75 und 85%. Diese Zahlen sind für Patienten jeden Alters und beider Geschlechter gleich. Eine physiologische Abnahme der Phagozytose kann während der Schwangerschaft, nach körperlicher Aktivität, die nicht dem Trainingsniveau entspricht, und nach emotionaler Belastung festgestellt werden.

Erhöhung und Verringerung des Indikators

Eine Erhöhung der phagozytären Aktivität von Leukozyten hat keine diagnostische Bedeutung, akute Infektionen können Ursache werden. Die Aktivität von Monozyten und Neutrophilen nimmt gegenüber dem Ausgangsniveau zu.

Die Analyse der phagozytischen Aktivität von Leukozyten bezieht sich auf immunologische Forschungsmethoden. Seine Indikatoren ermöglichen es, die Reservefähigkeit von Blutzellen zur Aufnahme und Verdauung von Infektionserregern zu bestimmen, dh die Bereitschaft des Körpers, der Entwicklung der Krankheit zu widerstehen. Wenn die Ergebnisse der Analyse unter der Norm liegen, muss der behandelnde Arzt konsultiert werden - ein Immunologe, ein Spezialist für Infektionskrankheiten, ein Chirurg, ein Rheumatologe, ein Onkologe. Der physiologische Leistungsabfall kann durch die richtige Auswahl der körperlichen Aktivität, Stressprävention, korrigiert werden.

Phagozytenaktivität von Neutrophilen aus menschlichem Blut in hypotonischen Medien in Gegenwart von Antibiotika

PHAGOZYTISCHE AKTIVITÄT VON NEUTROPHILEN DES MENSCHLICHEN BLUTS IN HYPOTONISCHEM MEDIUM DURCH ANTIBIOTISCHE WIRKUNG

AA Mischtschenko, E.M. Savelyeva

AA Mischenko, E.M. Savelyeva

Die phagozytische Aktivität von Neutrophilen aus menschlichem Blut wurde in einem hypotonischen Medium und in Gegenwart einer Reihe von Antibiotika untersucht. Eine Verringerung des Tonus um das 1,5- bis 2,0-fache führt zu einem Anstieg der Phagozytoseparameter um 16 %. In Gegenwart von Furosemid zeigt sich die Wirkung einer Hypotonie nicht. Verschiedene Antibiotika bewirken eine starke Hemmung der Phagozytose.

Es wurde die phagozytische Reaktion menschlicher Neutrophiler im hypotonischen Medium und in Gegenwart von Antibiotika untersucht. Die Verringerung des Tonus des Mediums um das 1,5- bis 2-fache verursacht eine Erhöhung der Phagozytoseparameter um 16 %. Beim Vorhandensein furosemida wird der Effekt der Hypotonie nicht gezeigt. Verschiedene Antibiotika bewirkten eine starke Hemmung der Phagozytose.

Schlüsselwörter: Neutrophile, Phagozytose, phagozytische Aktivität, Hypotonie.

Schlüsselwörter: Neutrophile, Phagozytose, phagozytische Aktivität, Hypotonie.

Einführung

Die Hauptbarriere für das Eindringen von Infektionen in den Körper sind die Schleimhäute. Als Mehrkomponentensysteme sind sie an vielen Reaktionen des Körpers beteiligt, auch an Immunreaktionen. Normalerweise enthält die Schleimhaut Immunglobuline und eine kleine Anzahl von Neutrophilen und Makrophagen. Es sind diese Zellen, die als erste mit Krankheitserregern in Kontakt kommen, während im Falle des Eindringens der letzteren in die Dicke des Gewebes lymphoide Ansammlungen in der Dicke der Schleimhäute zu einer Barriere werden.

Da die Oberflächen der Schleimhäute zum Blutplasma nicht isotonisch sind, ist es zweckmäßig, Experimente in einem anisotonischen Medium in vitro durchzuführen, um die Funktion von Zellen des Immunsystems unter solchen Bedingungen zu beurteilen. So wurde gezeigt, dass in hypotonischen Lösungen in Leukozyten eine Sauerstoffexplosion aktiviert wird, der Stoffwechsel von Arachidonsäure und die Konzentration von Calciumionen ansteigt. In unserer Arbeit wurden Studien zur phagozytischen Aktivität von Blutneutrophilen bei der Simulation hypotonischer Bedingungen durchgeführt. Da Ärzte im Falle eines entzündlichen Prozesses im Körper häufig eine Antibiotikatherapie verschreiben, wurde auch die Wirkung von Antibiotika verschiedener Klassen auf die phagozytische Aktivität von Blutneutrophilen untersucht.

Objekte und Methoden

Die Experimente verwendeten venöses Blut männlicher Spender, das von der republikanischen Bluttransfusionsstation (Syktyvkar) erhalten wurde. 500 &mgr;l Blut wurden für immunologische Reaktionen in die Vertiefungen der Platte gegeben. Eine Suspension von Hefezellen (OOO Saf-Neva), die vorher dreimal mit 0,9 %iger NaCl-Lösung gewaschen worden war, wurde zu jeder Vertiefung gegeben. Die Anzahl der Hefezellen betrug im Durchschnitt 30.000/1 ul Blut.

Um die Tonizität um das 2,0- und 1,5-fache zu verringern, wurde destilliertes Wasser (pH 7,4) in die Vertiefungen gegeben. In einer Reihe von Experimenten wurde den Vertiefungen mit iso- und hypotonischen Medien auch Furosemid in einer Konzentration von 1 × 10 –5 Mol/l zugesetzt.

In Experimenten mit Antibiotika wurden Lincomycin, Ceftriaxon, Amoxiclav und Gentamicin in einer Konzentration von 30 mg/l in die Vertiefungen gegeben.

Die Proben wurden in einem Thermostat bei 37°C für 20 min inkubiert. Dann wurde die Platte auf Eis gelegt, um die Phagozytosereaktion zu stoppen, und von jeder Vertiefung wurden 3 Abstriche hergestellt. Nach dem Trocknen und Fixieren wurden die Ausstriche nach Giemsa-Romanovsky gefärbt und unter einem Mikroskop bei einer Immersionsvergrößerung von 15*90 betrachtet.

Folgendes wurde berechnet: 1) phagozytische Aktivität – die Anzahl aktiver Neutrophiler von 100, die während des Betrachtens angetroffen werden; 2) Phagozytenindex - die durchschnittliche Anzahl von Hefezellen, die von einem Neutrophilen absorbiert werden. Die Ergebnisse wurden nach der Methode des paarweisen Vergleichs verarbeitet, die Signifikanz der Unterschiede zwischen den Proben wurde mit dem Wilcoxon-Test bewertet.

Resultate und Diskussion

Bei der Kontrolle betrug die Phagozytose-Aktivität menschlicher Blutleukozyten 49,5 ± 5 %, der Phagozytose-Index 1,64 ± 0,1 (n = 20). Die Daten stimmen mit den Ergebnissen überein, die bei der Untersuchung der Phagozytose von pathogenem Candida crusei erhalten wurden. Die phagozytische Aktivität von Neutrophilen wird unter diesen Bedingungen durch P-Glucane in der Hefezellwand stimuliert, für die es Rezeptoren auf der Oberfläche von Phagozyten gibt, sowie durch die opsonisierende Wirkung der Komponenten des C3bi-Komplementsystems und der darin vorhandenen IgG-Immunglobuline Blutplasma.

Bei einer Verringerung des Tonus des Mediums um das 1,5- und 2,0-fache (n=20) stieg die Phagozytenaktivität im Durchschnitt um 16,5 % auf 58,1 ± 9,1 % (S<0.05). Увеличился также фагоцитарный индекс до 1.97±0.06 и 2.14±0.58 при снижении тоничности в 1.5 и 2.0 раза соответственно. Таким образом, гипотония вызвала активацию фагоцитоза, что отразилось в увеличении как доли активных клеток, так и скорости поглощения фагоцитами дрожжей. Одним из механизмов такого

Die Wirkung von Hypotonie kann eine Erhöhung der Konzentration von intrazellulärem Calcium sein, was zu Veränderungen im Zytoskelett von Zellen, ihrer Mobilität und phagozytischen Aktivität führt. Darüber hinaus kann sich die Zellaktivität unter diesen Bedingungen als Folge des Auslösens der regulatorischen Volumenreduktion, RVD, als Reaktion auf die Zellschwellung ändern. Um den Einfluss des letzteren auszuschließen, hemmte Furosemid den K+,Cl"-Cotransport, dessen Aktivierung zu RVD führt. ), was mit den veröffentlichten Daten übereinstimmt Kontrolle und reduzierte sie im Vergleich zu den Ergebnissen im hypotonischen Milieu in Abwesenheit der Substanz (S<0.05). В частности, в присутствии фуросемида фагоцитарная активность и фагоцитарный индекс составили 45.9±6.7%; 1.83±0.1 и 50.5±5.6%; 1.7±0.1 соответственно при

Hypotonie 1,5 und 2,0. Durch Blockieren der RVD-Antwort verhinderte Furosemid daher die Zellaktivierung unter Hypotonie-Bedingungen.

Unter der Wirkung von Antibiotika nahmen die Indikatoren der phagozytischen Aktivität ab. Unter der Wirkung von Ceftriaxon nahm die phagozytische Aktivität um 78 % auf 10 ± 2,3 % ab (S<0.02), амоксиклав - на 70% до 17±3.9% (р<0.02), линкомицин - на 65% до 16±4.9% (р<0.02), гентамицин - на 76% до 11±3.6% (р<0.02). Фагоцитарный индекс в экспериментах с антибиотиками практически оставался неизменным, следовательно, данные препараты не влияют на скорость поглощения клеток.

In einer Reihe von Arbeiten wurde eine Zunahme der phagozytischen Aktivität unter dem Einfluss von Antibiotika festgestellt. Nach anderen Daten wird die phagozytische Aktivität von Leukozyten durch die Wirkung von Antibiotika wie Aureomycin unterdrückt. Oxytstracyclin, Erythromycin, Chloramphenicol, Polymyxin B verursachen keine merklichen Veränderungen in der phagozytischen Aktivität von Leukozyten.

Die in den Versuchen verwendeten Antibiotika gehören ihrer Wirkung nach verschiedenen Gruppen an. Amoxiclav und Ceftriaxon wirken als bakterizide Arzneimittel (hemmen die Entwicklung der Zellwand und hemmen die Synthese von Peptidoglycan, Murein, spezifisch für die Bakterienzellwand). Lincomycin und Gentamicin wirken in niedrigen Konzentrationen bakteriostatisch und bakterizid - mit steigender Konzentration (inhibieren die Proteinsynthese durch Bindung an die 50er und 30er Untereinheiten des Ribosoms). Alle Antibiotika in unseren Experimenten hatten eine hemmende Wirkung auf Neutrophile. Dies kann auf eine Änderung in der Struktur zurückzuführen sein

antibakterielle Medikamente aufgrund von Stoffwechselprozessen im Körper, wodurch Stoffwechselprodukte toxisch werden

die Fresszellen selbst. Antibiotika sind eine der Hauptursachen für Neutropenie und Agranulozytose. Diese Wirkung wurde durch Penicilline, Cephalosporine und Sulfonamide ausgeübt. Das Aminoglykosid Gentamicin erhöht die Produktion von Lysosomen, die verschiedene Virulenzfaktoren enthalten. Vertreter der P-Lactam-Antibiotika, Amoxiclav und Ceftriaxon, können die oxidative Burst-Reaktion unterdrücken.

Daten zur Wirkung von Lincosaminen, zu denen auch das verwendete Lincomycin gehört, auf die phagozytische Aktivität sind widersprüchlich. Bei verschiedenen Konzentrationen des Arzneimittels stellen die Autoren sowohl eine Zunahme der phagozytischen Aktivität als auch eine Abnahme oder keine Änderung fest. Es ist möglich, dass die in unseren Experimenten verwendete Konzentration von Antibiotika für Zellen toxisch war.

1. Bei der Kontrolle betrugen die phagozytische Aktivität und der phagozytische Index 49,5 ± 5 % bzw. 1,64 ± 0,1.

2. Das Ersetzen eines isotonischen Mediums durch ein hypotonisches Medium bewirkt eine Erhöhung sowohl der phagozytischen Aktivität als auch des phagozytischen Index um 16,5 % bzw. das 1,5- bis 2-fache.

3. In Gegenwart von Furosemid zeigt sich die Wirkung von Hypotonie auf die phagozytische Aktivität von Neutrophilen nicht.

4. Die Antibiotika Ceftriaxon, Amoxiclav, Lincomycin und Gentamicin bewirken eine Hemmung der phagozytischen Aktivität von Neutrophilen um 78 %, 76 %, 65 % bzw. 70 %.

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Phagozytische Aktivität von Leukozyten- Dies ist die Definition des Gehalts an Neutrophilen und Monozyten, die in der Lage sind, an ihrer Oberfläche zu binden, eine mikrobielle Testkultur aufzunehmen und zu verdauen (markierte Bakterien).

Indikationen für die Ernennung eines Labortests:

• Häufig wiederkehrende Infektionen
• wiederkehrende eitrige Entzündungsprozesse,
• langfristig nicht heilende Wunden,
• häufige postoperative Komplikationen,
• Verdacht auf Autoimmunerkrankung
• dynamische Überwachung solcher Patienten, Bewertung der Aktivität und Wirksamkeit der Therapie bei Kollagenosen und rheumatischen Erkrankungen.

Ursachen für erhöhte phagozytische Aktivität von Leukozyten:

• akute bakterielle Infektionen.

Die Gründe für die Abnahme der phagozytischen Aktivität von Leukozyten:

• angeborene Immundefekte
• chronische Infektionen
• Autoimmunerkrankungen
• allergische Erkrankungen
• Virusinfektionen
• vom Menschen erworbenes Immunschwächesyndrom

Eine besondere Vorbereitung auf das Studium ist nicht erforderlich. Es müssen die allgemeinen Regeln zur Vorbereitung auf die Forschung befolgt werden.

ALLGEMEINE REGELN ZUR VORBEREITUNG FÜR DIE FORSCHUNG:

1. Für die meisten Studien wird empfohlen, Blut morgens zwischen 8 und 11 Uhr auf nüchternen Magen zu spenden (zwischen der letzten Mahlzeit und der Blutentnahme sollten mindestens 8 Stunden liegen, Wasser kann wie gewohnt getrunken werden), am Vorabend der Studie ein leichtes Abendessen mit Einschränkung auf fetthaltige Speisen. Für Infektionstests und Notfalluntersuchungen ist es akzeptabel, Blut 4-6 Stunden nach der letzten Mahlzeit zu spenden.

2. AUFMERKSAMKEIT! Besondere Regeln für die Vorbereitung auf eine Reihe von Tests: streng auf nüchternen Magen, nach 12-14 Stunden Fasten sollten Sie Blut für Gastrin-17, Lipidprofil (Gesamtcholesterin, HDL-Cholesterin, LDL-Cholesterin, VLDL-Cholesterin, Triglyceride, Lipoprotein (a), Apolipoprotein A1, Apolipoprotein B); ein Glukosetoleranztest wird morgens auf nüchternen Magen nach 12-16 Stunden Fasten durchgeführt.

3. Am Vorabend der Studie (innerhalb von 24 Stunden) Alkohol, intensive körperliche Aktivität, Medikamente (nach Absprache mit dem Arzt) ausschließen.

4. 1-2 Stunden vor der Blutspende Rauchen unterlassen, keinen Saft, Tee, Kaffee trinken, Sie können Wasser ohne Kohlensäure trinken. Beseitigen Sie körperlichen Stress (Laufen, schnelles Treppensteigen), emotionale Erregung. Es wird empfohlen, sich 15 Minuten vor der Blutspende auszuruhen und zu beruhigen.

5. Unmittelbar nach physiotherapeutischen Eingriffen, instrumentellen Untersuchungen, Röntgen- und Ultraschalluntersuchungen, Massagen und anderen medizinischen Eingriffen sollten Sie kein Blut für Laboruntersuchungen spenden.

6. Bei der Überwachung von Laborparametern in der Dynamik wird empfohlen, wiederholte Studien unter denselben Bedingungen durchzuführen - im selben Labor, zur selben Tageszeit Blut zu spenden usw.

7. Blutspenden für die Forschung sollten vor Beginn der Einnahme von Medikamenten oder frühestens 10-14 Tage nach deren Absetzen erfolgen. Um die Kontrolle der Wirksamkeit der Behandlung mit Medikamenten zu bewerten, muss 7-14 Tage nach der letzten Dosis des Medikaments eine Studie durchgeführt werden.

Wenn Sie Medikamente einnehmen, informieren Sie unbedingt Ihren Arzt darüber.

Laborbewertung angeborener Immunitätsstörungen

Funktionsbeurteilung von B-Lymphozyten

Die Bestimmung der Konzentration von Immunglobulinen im Blutserum und anderen biologischen Flüssigkeiten ist einer der wichtigsten integralen Indikatoren für die funktionelle Nützlichkeit von B-Lymphozyten und des gesamten Regulationssystems der humoralen adaptiven Immunität.

Traditionell wurde die Konzentration von Serum-Immunglobulinen bestimmt durch die Methode der radialen Immundiffusion in Gel nach Mancini. Derzeit wird diese Methode noch verwendet, bevorzugt werden monoklonale Antikörper gegen einzelne antigene Determinanten (Epitope), die für einzelne Klassen von Immunglobulinen charakteristisch sind.

Das Prinzip der Mancini-Methode liegt darin, dass die Proben der untersuchten Seren in Agarvertiefungen gegeben werden, die Antikörper gegen IgM, IgG, IgA in einer Standardkonzentration enthalten. Die im Testserum enthaltenen Immunglobuline diffundieren in den Agar und bilden bei Wechselwirkung mit den entsprechenden Antikörpern Präzipitationsringe. Solange ein Überschuss an Antigen in der Vertiefung vorhanden ist, nimmt der Durchmesser des Präzipitationsrings allmählich zu. Die endgültige Größe des Präzipitationsrings hängt von der Konzentration der jeweiligen Immunglobuline ab. Mit der Mancini-Methode können Sie die Konzentration von Immunglobulinen von 10 μg / ml bestimmen. Der Methodenfehler beträgt 10 %.

Zur Diagnose angeborener Immunitätsstörungen wird üblicherweise die phagozytische und metabolische Aktivität von Neutrophilen bestimmt und der Zustand des Komplementsystems beurteilt.

Am aufschlussreichsten für die Beurteilung des Phagozytensystems sollten der Phagozytenindex, die Phagozytenzahl (spiegelt die Absorptionskapazität von Neutrophilen wider) und der bakterizide Index (spiegelt die Verdauungskapazität der Neutrophilen wider).

Phagozytischer Index(FI) - der Prozentsatz der Zellen, die in die Phagozytose eingetreten sind, von ihrer Gesamtzahl.

phagozytische Zahl(PF) ist die durchschnittliche Anzahl von Bakterien oder Latexpartikeln, die pro Neutrophil absorbiert werden.

Auch gehalten spontane und stimulierte Phagozytosetests unter Verwendung von Latexpartikeln. Die Phagozytose mit Latex basiert auf der Absorption von Latexpartikeln durch Neutrophile (Adhäsion, Einfang und vollständige Absorption).

Bei der Durchführung eines Spontantests werden aus peripherem Blut isolierte Leukozyten mit einer Suspension von Latexpartikeln gemischt; Während des Tests der induzierten Phagozytose wird der resultierenden Mischung pyrogene Lösung zugesetzt. Nach 30-minütiger Inkubation bei 37°C werden Abstriche hergestellt, und dann wird der Prozentsatz an Neutrophilen, die Latex absorbiert haben, in fixierten und Romanovsky-Giemsa-gefärbten Abstrichen berechnet.

Nitroblau-Tetrazolium-Reduktionstest–NST-Test ermöglicht es Ihnen, die Stoffwechselaktivität von Blutgranulozyten zu bewerten, zeigt die Reservekapazität von intrazellulären Systemen von Phagozyten. Der NBT-Test basiert auf der Reduktion eines löslichen Farbstoffs, Nitroblau-Tetrazolium, der von Blutleukozyten zu unlöslichem schwarzem Diformazan (intranukleäre Einschlüsse - Diformazan-Klumpen) unter dem Einfluss von Superoxid-Anionen gebildet wird, die in der NADP-H-Oxidase-Reaktion gebildet werden, die die auslöst Prozess der Phagozytosestimulation.

Erklärung der Reaktion. 0,02 ml 0,9 %ige Kochsalzlösung, 0,02 ml neutrophile Suspension und 0,02 ml 0,75 %ige NBT-Lösung (Nitrosintetrazolium) werden auf einen fettfreien Glasobjektträger aufgetragen.

Als Beladung wird ein handelsübliches Lipopolysaccharid aus Gram-negativen Bakterien E. coli oder pyrogene Lösung (S. typhi-Lipopolysaccharid) in einer Verdünnung von 1:10 verwendet. 0,02 ml LPS, 0,02 ml neutrophile Suspension und 0,02 ml 0,75 % HBT-Lösung werden auf ein weiteres entrahmtes Glas aufgetragen. 30 Minuten in eine feuchte Kammer gelegt. Abstriche werden vorbereitet, getrocknet, fixiert. Angefärbt mit 0,1 % Neutralrotlösung. Neutrophile werden berücksichtigt, indem der Prozentsatz von Leukozyten mit reduzierten HBT-Granula (schwarzes Diformazan) berechnet wird.